W całym królestwie zwierząt wielowartościowość odróżnia przeciwciała od wszystkich innych członków nadrodziny immunoglobulin. Siły ewolucyjne zachowujące wielowartościowość ponad innymi strukturalnymi cechami charakterystycznymi przeciwciał pozostają jednak nie do końca zdefiniowane. Tutaj opracowujemy monowalentne formaty przeciwciał kompetentnych pod względem Fc lub z niedoborem, aby zbadać mechanizmy ochrony przeciwciał neutralizujących (nAbs) i przeciwciał nieneutralizujących (nnAbs) u myszy zakażonych wirusem.
Biwalentność przeciwciał umożliwia wiązanie wirionów z zakażoną powierzchnią komórki, hamuje uwalnianie wirionów w hodowli komórkowej i tłumi obciążenie wirusem in vivo niezależnie od oddziaływań receptora Fc gamma (FcγR). W zamian, formaty przeciwciał monowalentnych albo nie hamują uwalniania wirionów, ani nie chronią in vivo, albo ich skuteczność ochronna jest w dużej mierze zależna od FcγR. Ochrona u myszy koreluje raczej z aktywnością nAb i nnAb hamującą uwalnianie wirusa niż z ich zdolnością neutralizacyjną. Obserwacje te dostarczają mechanistycznego wglądu w ewolucyjną konserwację biwalencji przeciwciał i pomagają uściślić korelacje ochrony nnAb w rozwoju szczepionek.
Kolostrogeneza jest odrębną i unikalną fazą aktywności komórek nabłonka gruczołu sutkowego, występującą na kilka tygodni przed porodem i kończącą się raczej gwałtownie po urodzeniu u bydła.
- Celem badań było określenie, co kontroluje ten proces i w jaki sposób wytwarza on wysokie stężenia określonych biologicznie aktywnych składników ważnych dla noworodka. W tym przeglądzie rozważamy skład siary i skupiamy się na składnikach, które pojawiają się w pierwszej dojonej siarze w stężeniach przekraczających stężenie w surowicy krwi.
- Receptor Fc noworodka (FcRn) jest rozpoznawany jako główna immunoglobulina G (IgG) i białko wiążące albuminy, które odpowiadają za długi okres półtrwania białek. Integrujemy działanie wychwytu pinocytotycznego (fazy płynnej) składników zewnątrzkomórkowych i łączymy je z FcRn w sortowaniu endosomów.
- Definiujemy i badamy sposoby wiązania, sortowania i transcytotycznego dostarczania IgG1 podczas recyklingu IgG2 i albuminy. Rozważamy sposoby uwalniania ligandów z receptora w endosomie i opisujemy nowy mechanizm wydzielania ładunku do siary bez pojawiania się samego FcRn w siarze.
- Integrujemy rodzinę insulinopodobnych czynników wzrostu, z których niektóre są wysoce skoncentrowanymi bioaktywnymi składnikami siary, z mechanizmami związanymi z działaniem endosomów FcRn. Oprócz wydzielania, podkreślamy ostatnie odkrycia dotyczące roli FcRn w fagocytozie i prezentacji antygenu oraz wiążemy jego znaczącą i nagłą zmianę w lokalizacji komórkowej po porodzie z rolą w zapobieganiu i odporności na infekcje mastitis. Receptor Fc dla IgM , FcMR, jest niezwykły, ponieważ jest preferencyjnie wyrażany przez komórki adaptacyjnego układu odpornościowego.
- Jest to ponadto jedyny receptor Fc ulegający konstytutywnej ekspresji na ludzkich limfocytach T. Wysiłki zmierzające do odszyfrowania normalnych funkcji FcMR zostały utrudnione przez specyficzne dla gatunku wzorce ekspresji w limfocytach myszy (komórki B) w porównaniu z ludźmi (komórki B, NK i T). W komórkach ludzkich doniesiono, że ekspresja FcMR na powierzchni komórek jest niska na poziomie wyjściowym ex vivo, przy czym jednym sugerowanym wkładem jest indukowana przez ligand internalizacja przez surowicze IgM. Rzeczywiście, wstępna inkubacja przez noc w pożywce hodowlanej wolnej od IgM jest zalecana do badań FcMR, ponieważ w tych warunkach ekspozycja powierzchniowa jest zwiększona.
- Zbadaliśmy prezentację FcMR na ludzkich limfocytach w PBMC i odkryliśmy, co zaskakujące, że poziom IgM nie miał wpływu na FcMR na powierzchni komórek, a zamiast tego był regulowany w dół w hodowlach o wysokiej gęstości komórek przez jeszcze nieokreślony mechanizm . Odkryliśmy ponadto, że przetwarzanie ex vivo pełnej krwi zmniejszyło FcMR powierzchni, potwierdzając ideę, że ekspresja FcMR jest prawdopodobnie większa na krążących limfocytach niż wcześniej sądzono. Podsumowując, odkrycia te dają nowe przewidywania, gdzie i kiedy FcMR może być dostępny dla interakcji funkcjonalnych in vivo.
Autoprzeciwciała są coraz częściej rozpoznawane ze względu na ich potencjał patogenny w coraz większej liczbie chorób neurologicznych.
Podczas gdy myasthenia gravis reprezentuje prototypową chorobę neurologiczną, w której pośredniczą przeciwciała (Ab), w ciągu ostatnich dwóch dekad zidentyfikowano o wiele więcej zaburzeń charakteryzujących się tym, że przeciwciała są ukierunkowane na antygeny neuronalne lub glejowe. Ubytek humoralnych składników immunologicznych, w tym immunoglobuliny G (IgG), poprzez wymianę osocza lub immunoadsorpcję, jest skuteczną strategią terapeutyczną w większości tych stanów chorobowych.
Noworodkowy receptor Fc (FcRn), wyrażany głównie przez komórki śródbłonka i szpiku, ułatwia recykling IgG i wydłuża okres półtrwania cząsteczek IgG. Blokada FcRn zapobiega wiązaniu endogennej IgG do FcRn, co zmusza te przeciwciała do degradacji lizosomalnej, prowadząc do wyczerpania IgG. Zwiększenie degradacji endogennej IgG przez terapie ukierunkowane na FcRn okazało się potężnym podejściem terapeutycznym u pacjentów z uogólnionym MG i jest obecnie testowane w badaniach klinicznych pod kątem kilku innych chorób neurologicznych, w tym autoimmunologicznych encefalopatii, zaburzeń ze spektrum zapalenia nerwu wzrokowego i neuropatii zapalnych. Niniejszy przegląd ilustruje mechanizmy terapii ukierunkowanych na FcRn i ocenia ich potencjał w leczeniu chorób neurologicznych.
Receptor Fc (FcR) jest ważnym receptorem opsoninowym na powierzchni komórek odpornościowych, odgrywającym ważną rolę w zależnej od przeciwciał odporności komórkowej.
Nasza poprzednia praca wykazała, że FcR flądry wykazywał wyraźną odpowiedź ekspresyjną w fagocytujących komórkach IgM + B, co sugerowało, że FcR może uczestniczyć w regulacji fagocytozy opsonizowanej przez Ig. W niniejszej pracy, w celu wyjaśnienia potencjalnej roli FcR w pośredniczeniu w fagocytozie limfocytów IgM + B, przygotowano surowicę przeciw E. tarda flądry i inaktywowano dopełniacz do użycia w opsonizacji E. tarda oraz surowicę zdrowej flądry były używane jako kontrola.
Analiza cytometrii przepływowej wykazała, że wskaźniki fagocytozy E. tarda opsonizowanych antysurowicą w limfocytach mIgM + B krwi obwodowej były znacznie wyższe niż w grupie kontrolnej, a wyższe wskaźniki fagocytozy limfocytów mIgM + B można było wykryć wraz ze wzrostem czasu inkubacji w zakresie od 1 do 5 godz. Wskaźniki fagocytozy E. tarda opsonizowanej antysurowicą przez limfocyty mIgM + B dla czasu inkubacji 1, 3 lub 5 godzin wynosiły odpowiednio 51,1, 63,0 i 77,5%, i były znacznie wyższe niż wskaźniki fagocytozy w grupach kontrolnych z 40,2 , odpowiednio 50,9 i 63,8%. Podczas gdy fragment Fc IgM na powierzchni opsonizowanej E. tarda została zablokowana przez królicze przeciwciała poliklonalne IgM przeciwko flączce, wskaźniki fagocytozy limfocytów mIgM + B znacznie spadły w porównaniu z grupą niezablokowaną. Co więcej, odsetek limfocytów mIgM + B z wyższymi poziomami wewnątrzkomórkowych reaktywnych form tlenu (ROS) wzrósł do 32,1% z poziomu kontrolnego 23,0% po fagocytozie opsonizowanego antysurowicą E. tarda .
Fc Receptor Blocker, 15ml |
|||
NB309-15 | Innovex | 15 ml | 470.4 EUR |
Color Reagent A, 15ML |
|||
X094-15ML | Arbor Assays | 15ML | 146.4 EUR |
Color Reagent B, 15ML |
|||
X095-15ML | Arbor Assays | 15ML | 146.4 EUR |
Fc Receptor Blocker; 4X Concentrate, 15ml NEW |
|||
NB309-4X-15 | Innovex | 15 ml of 4X | 930 EUR |
15ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, UNASSEMBLED |
|||
SCT-15ML-500 | CORNING | 50/pk | 111.6 EUR |
Amersham ECL blocking agent 40g |
|||
RPN2125 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 70.68 EUR |
Goat Anti-Human IgM (Fc 5u) Antibody (HRP) |
|||
abx023528-15ml | Abbexa | 1.5 ml | 610.8 EUR |
Sheep IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative |
|||
7615-Fc | Alpha Diagnostics | 1 kit | 854.4 EUR |
Horse IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative |
|||
7715-Fc | Alpha Diagnostics | 1 kit | 854.4 EUR |
15ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, ASSEMBLED, PRE-STERILIZED |
|||
SCT-15ML-25-S | CORNING | 25/pk | 133.2 EUR |
Dog IgG (Fc) fragment (isotype control, non-immune), purified |
|||
20016-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
15ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, RACKED, ASSEMBLED, PRE-STERILIZED |
|||
SCT-15ML-R-S | CORNING | 50/pk | 146.4 EUR |
Human IgG (Fc) fragment, purified |
|||
20007-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 249.6 EUR |
Mouse IgG (Fc) fragment, purified |
|||
20008-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Rabbit IgG (Fc) fragment, purified |
|||
20009-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Goat IgG (Fc) fragment, purified |
|||
20011-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Rat IgG (Fc) fragment, purified (isotype control) |
|||
20005-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Goat IgG (fc)-Biotin conjugate (isotype control) |
|||
20011-Fc-B | Alpha Diagnostics | 100 ug | 196.8 EUR |
Goat IgG (fc)-FITC conjugate (isotype control) |
|||
20011-Fc-F | Alpha Diagnostics | 100 ug | 196.8 EUR |
Goat IgG (fc)-HRP conjugate (isotype control) |
|||
20011-Fc-HP | Alpha Diagnostics | 100 ug | 196.8 EUR |
Antitumor agent-3 |
|||
HY-15961 | MedChemExpress | 5mg | 639.6 EUR |
Antifungal agent 1 |
|||
HY-102025 | MedChemExpress | 50mg | 2664 EUR |
Antiulcer Agent 1 |
|||
HY-U00122 | MedChemExpress | 1mg | 391.2 EUR |
Anticonvulsant agent 1 |
|||
HY-U00348 | MedChemExpress | 5mg | 3415.2 EUR |
Bronchospasmolytic agent 1 |
|||
HY-U00405 | MedChemExpress | 1mg | 555.6 EUR |
Antitumor agent-4 |
|||
HY-U00414 | MedChemExpress | 20mg | 16126.8 EUR |
Bifunctional Antiplatelet Agent |
|||
H-1662.0001 | Bachem | 1.0mg | 356.4 EUR |
Bifunctional Antiplatelet Agent |
|||
H-1662.0005 | Bachem | 5.0mg | 1311.6 EUR |
PDE Binding Agent |
|||
60390 | BPS Bioscience | 100 µl | 150 EUR |
Dog IgG (Fc) fragment (isotype control, non-immune), purified |
|||
20016-3-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Dog IgG Fc-Biotin Conjugate (isotype control, non-immune), purified |
|||
20016-FC-B | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 270 EUR |
Dog IgG Fc-FITC Conjugate (isotype control, non-immune), purified |
|||
20016-FC-F | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 270 EUR |
Dog IgG Fc-HRP Conjugate (isotype control, non-immune), purified |
|||
20016-FC-HP | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 270 EUR |
15PL 15mL Rack for 15mL Tubes |
|||
HS23215 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 35.45 EUR |
EL Transfection Reagent |
|||
20-abx098880 | Abbexa |
|
|
Sufa synergist agent(SSA) |
|||
AG243 | Unibiotest | 1 mg | 627.6 EUR |
Sufa synergist agent(SSA) |
|||
AT243 | Unibiotest | 1mg | 1641.6 EUR |
Anti-inflammatory agent 1 |
|||
HY-U00273 | MedChemExpress | 10mg | 1746 EUR |
Anti-inflammatory agent 2 |
|||
HY-U00299 | MedChemExpress | 20mg | 5763.6 EUR |
Anti-neurodegeneration agent 1 |
|||
HY-U00314 | MedChemExpress | 20mg | 5763.6 EUR |
Decitabine (DNA hypomethylation agent) |
|||
SIH-352-10MG | Stressmarq | 10 mg | 192 EUR |
Decitabine (DNA hypomethylation agent) |
|||
SIH-352-50MG | Stressmarq | 50 mg | 406.8 EUR |
Vildagliptin (Anti-diabetic agent) |
|||
SIH-567-100MG | Stressmarq | 100 mg | 277.2 EUR |
Vildagliptin (Anti-diabetic agent) |
|||
SIH-567-20MG | Stressmarq | 20 mg | 138 EUR |
Label 100X100 Oxidizing Agent.. |
|||
C47AS | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 4.89 EUR |
Label 200X200 Oxidizing Agent.. |
|||
C47BS | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 12.45 EUR |
Recombinant (HEK) Human IgG3-Fc (99-377aa, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20007-G3-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Rat IgG (Fc)-Biotin Conjuagte (isotype control), purified |
|||
20005-1-FC-B | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 270 EUR |
Rat IgG (Fc)-FITC Conjuagte (isotype control), purified |
|||
20005-1-FC-F | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 270 EUR |
Rat IgG (Fc)-HRP Conjuagte (isotype control), purified |
|||
20005-1-FC-HP | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 270 EUR |
Human IgG (Fc) fragment, purified (>95%, low endotoxin) |
|||
20007-1-FC-LE | Alpha Diagnostics | 100 ul | 270 EUR |
Recombinant (HEK) Mouse IgG2a-Fc (98-330aa, ~34 kda, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20102-102-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Recombinant (HEK) Mouse IgG2b-Fc (97-335aa, ~37 kda, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20102-103-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Recombinant (HEK) Mouse IgG3-Fc (97-329aa, ~33 kda, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20102-104-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Recombinant (HEK) Human IgG1 Fc (103Cys/Ser, 99-330aa, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20007-G1-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Recombinant (HEK) Human IgG2-Fc (257Ser/Ala, 99-327aa, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20007-G2-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Recombinant (HEK) Human IgG4-Fc (108Ser/Pro, 99-327aa, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20007-G4-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Recombinant Human CD47 Protein, His-Fc (IgG), Insect-10ug |
|||
QP11336-HIS-Fc-10ug | EnQuireBio | 10ug | 241.2 EUR |
Recombinant (HEK) Mouse IgG1-Fc (98-321aa, 102Cys/Ser, ~32 kda, His-tag, >95%, low endotoxin) |
|||
20102-101-FC | Alpha Diagnostics | 50 | 343.2 EUR |
Human IgG Fc-Biotin conjugate (isotype control, non-immune), purified |
|||
20007-1-Fc-B | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 196.8 EUR |
Human IgG Fc-FITC conjugate (isotype control, non-immune), purified |
|||
20007-1-Fc-F | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 196.8 EUR |
Human IgG Fc-HRP conjugate (isotype control, non-immune), purified |
|||
20007-1-Fc-HP | Alpha Diagnostics | 0.1 mg | 196.8 EUR |
AEC Enhancer, 15ml |
|||
NB319 | Innovex | 15 ml | 266.4 EUR |
Colorex MRSA (15ml) |
|||
MED1282 | Scientific Laboratory Supplies | PK10 | 12.44 EUR |
Tube support 15mL |
|||
MIX1348 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 96.9 EUR |
Conical Tubes 15mL |
|||
E0030122208 | Scientific Laboratory Supplies | PK200 | 70.68 EUR |
Conical Tubes 15mL |
|||
E0030122259 | Scientific Laboratory Supplies | PK100 | 80.94 EUR |
Phase Separator 15ml |
|||
CHR5382 | Scientific Laboratory Supplies | PK100 | 118.56 EUR |
Volumetric Pipette 15mL |
|||
PIP1228 | Scientific Laboratory Supplies | PK12 | 343.14 EUR |
Anti-Heart Failure Agent 1 |
|||
HY-101729 | MedChemExpress | 20mg | 12754.8 EUR |
5-Azacytidine (DNA hypomethylation agent) |
|||
SIH-345-250MG | Stressmarq | 250 mg | 208.8 EUR |
5-Azacytidine (DNA hypomethylation agent) |
|||
SIH-345-50MG | Stressmarq | 50 mg | 126 EUR |
Reducing Agent (for Silica Testing) |
|||
RAST01 | Scientific Laboratory Supplies | 100ML | 102.6 EUR |
CO2 Std CO2 Release Agent |
|||
RR0207 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 131.1 EUR |
PDE Binding agent diluent (cAMP) |
|||
60391 | BPS Bioscience | 10 ml | 110 EUR |
PDE Binding agent diluent (cGMP) |
|||
60392 | BPS Bioscience | 10 ml | 100 EUR |
Fc Receptor Blocker, 60ml |
|||
NB309 | Innovex | 60 ml | 999.6 EUR |
Fc Receptor Blocker, 30ml |
|||
NB309-30 | Innovex | 30 ml | 609.6 EUR |
Fc Receptor Blocker, 5ml |
|||
NB309-5S | Innovex | 5 ml | 225.6 EUR |
PCR SuperMix (-dye) |
|||
20-abx098002 | Abbexa |
|
|
PCR SuperMix for PAGE (+dye) |
|||
20-abx098004 | Abbexa |
|
|
Green qPCR SuperMix |
|||
20-abx098031 | Abbexa |
|
|
Green qPCR SuperMix UDG |
|||
20-abx098032 | Abbexa |
|
|
Probe qPCR SuperMix |
|||
20-abx098040 | Abbexa |
|
|
CoolRack 15ml holds 9 x 15ml conical centrifuge tube |
|||
432061 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 343.14 EUR |
Human IgG (Fc) fragment-Biotin purified (>95%, low endotoxin) |
|||
20007-1-FC-LE-B | Alpha Diagnostics | 25 ug | 343.2 EUR |
Bialaphos sodium - bar gene selective agent |
|||
B013-100MG | TOKU-E | 100 mg | 186 EUR |
Bialaphos sodium - bar gene selective agent |
|||
B013-500MG | TOKU-E | 500 mg | 688.8 EUR |
Attoglow Western Blot Analysis Kit:Blocking Agent |
|||
K3171250-3 | Biochain | 40 g | 130.8 EUR |
CO2 Std CO2 Release Agent 200mL |
|||
RR021 | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 169.86 EUR |
Recombinant (HEK) Rabbit IgG (Fc) (101-323aa, 185Thr/Asn284Ser, ~33 kda, >95%, Low Endotoxin) |
|||
20009-1-R-FC | Alpha Diagnostics | 50 ug | 343.2 EUR |
Conical Tubes 15ml Racked |
|||
339651 | Scientific Laboratory Supplies | PK500 | 348.84 EUR |
Bottle Hdpe Amber 15Ml |
|||
2004-9050 | Scientific Laboratory Supplies | PK12 | 18.24 EUR |
Bottle Alpha 15ml Amber |
|||
BOT2036 | Scientific Laboratory Supplies | PK110 | 67.03 EUR |
Block 12 x 15mL |
|||
MIX7214 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 524.4 EUR |
Crucible Silica 15ml 41x25mm |
|||
CRU3004 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 43.32 EUR |
Nalgene 15ml Cryo Container |
|||
CRY8320 | Scientific Laboratory Supplies | PK75 | 172.14 EUR |
Eppendorf 15mL Tubes Sterile |
|||
E0030122151 | Scientific Laboratory Supplies | PK500 | 163.02 EUR |
15mL Conical Tubes Amber |
|||
E0030122194 | Scientific Laboratory Supplies | PK200 | 66.12 EUR |
Tube Holder 5/15mL |
|||
E5353040148 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 100.32 EUR |
Stwierdzono, że FcγRII i Syk były znacząco podwyższone, podczas gdy FcγRIII był znacząco obniżone w limfocytach mIgM + B po fagocytozie. Ponadto, gdy FcγRII limfocytów mIgM + B był blokowany przez wytworzone przeciwciała, ich współczynnik fagocytozy E. tarda opsonizowanych surowicą wynosił 39,0%, co było znacznie niższe niż w grupie odblokowanej 54,0%. Wyniki te pokazują, że FcR odgrywa kluczową rolę w pośredniczeniu w fagocytozie i aktywności bakteriobójczej limfocytów mIgM + B, co ułatwiłoby lepsze zrozumienie ról regulatorowych FcR w fagocytozy limfocytów teleost B.