W całym królestwie zwierząt wielowartościowość odróżnia przeciwciała od wszystkich innych członków nadrodziny immunoglobulin. Siły ewolucyjne zachowujące wielowartościowość ponad innymi strukturalnymi cechami charakterystycznymi przeciwciał pozostają jednak nie do końca zdefiniowane. Tutaj opracowujemy monowalentne formaty przeciwciał kompetentnych pod względem Fc lub z niedoborem, aby zbadać mechanizmy ochrony przeciwciał neutralizujących (nAbs) i przeciwciał nieneutralizujących (nnAbs) u myszy zakażonych wirusem.

Biwalentność przeciwciał umożliwia wiązanie wirionów z zakażoną powierzchnią komórki, hamuje uwalnianie wirionów w hodowli komórkowej i tłumi obciążenie wirusem in vivo niezależnie od oddziaływań receptora Fc gamma (FcγR). W zamian, formaty przeciwciał monowalentnych albo nie hamują uwalniania wirionów, ani nie chronią in vivo, albo ich skuteczność ochronna jest w dużej mierze zależna od FcγR. Ochrona u myszy koreluje raczej z aktywnością nAb i nnAb hamującą uwalnianie wirusa niż z ich zdolnością neutralizacyjną. Obserwacje te dostarczają mechanistycznego wglądu w ewolucyjną konserwację biwalencji przeciwciał i pomagają uściślić korelacje ochrony nnAb w rozwoju szczepionek.

Kolostrogeneza jest odrębną i unikalną fazą aktywności komórek nabłonka gruczołu sutkowego, występującą na kilka tygodni przed porodem i kończącą się raczej gwałtownie po urodzeniu u bydła.

• Celem badań było określenie, co kontroluje ten proces i w jaki sposób wytwarza on wysokie stężenia określonych biologicznie aktywnych składników ważnych dla noworodka. W tym przeglądzie rozważamy skład siary i skupiamy się na składnikach, które pojawiają się w pierwszej dojonej siarze w stężeniach przekraczających stężenie w surowicy krwi.
• Receptor Fc noworodka (FcRn) jest rozpoznawany jako główna immunoglobulina G (IgG) i białko wiążące albuminy, które odpowiadają za długi okres półtrwania białek. Integrujemy działanie wychwytu pinocytotycznego (fazy płynnej) składników zewnątrzkomórkowych i łączymy je z FcRn w sortowaniu endosomów.
• Definiujemy i badamy sposoby wiązania, sortowania i transcytotycznego dostarczania IgG1 podczas recyklingu IgG2 i albuminy. Rozważamy sposoby uwalniania ligandów z receptora w endosomie i opisujemy nowy mechanizm wydzielania ładunku do siary bez pojawiania się samego FcRn w siarze.
• Integrujemy rodzinę insulinopodobnych czynników wzrostu, z których niektóre są wysoce skoncentrowanymi bioaktywnymi składnikami siary, z mechanizmami związanymi z działaniem endosomów FcRn. Oprócz wydzielania, podkreślamy ostatnie odkrycia dotyczące roli FcRn w fagocytozie i prezentacji antygenu oraz wiążemy jego znaczącą i nagłą zmianę w lokalizacji komórkowej po porodzie z rolą w zapobieganiu i odporności na infekcje mastitis. Receptor Fc dla IgM , FcMR, jest niezwykły, ponieważ jest preferencyjnie wyrażany przez komórki adaptacyjnego układu odpornościowego.
• Jest to ponadto jedyny receptor Fc ulegający konstytutywnej ekspresji na ludzkich limfocytach T. Wysiłki zmierzające do odszyfrowania normalnych funkcji FcMR zostały utrudnione przez specyficzne dla gatunku wzorce ekspresji w limfocytach myszy (komórki B) w porównaniu z ludźmi (komórki B, NK i T). W komórkach ludzkich doniesiono, że ekspresja FcMR na powierzchni komórek jest niska na poziomie wyjściowym ex vivo, przy czym jednym sugerowanym wkładem jest indukowana przez ligand internalizacja przez surowicze IgM. Rzeczywiście, wstępna inkubacja przez noc w pożywce hodowlanej wolnej od IgM jest zalecana do badań FcMR, ponieważ w tych warunkach ekspozycja powierzchniowa jest zwiększona.
• Zbadaliśmy prezentację FcMR na ludzkich limfocytach w PBMC i odkryliśmy, co zaskakujące, że poziom IgM nie miał wpływu na FcMR na powierzchni komórek, a zamiast tego był regulowany w dół w hodowlach o wysokiej gęstości komórek przez jeszcze nieokreślony mechanizm . Odkryliśmy ponadto, że przetwarzanie ex vivo pełnej krwi zmniejszyło FcMR powierzchni, potwierdzając ideę, że ekspresja FcMR jest prawdopodobnie większa na krążących limfocytach niż wcześniej sądzono. Podsumowując, odkrycia te dają nowe przewidywania, gdzie i kiedy FcMR może być dostępny dla interakcji funkcjonalnych in vivo.

Autoprzeciwciała są coraz częściej rozpoznawane ze względu na ich potencjał patogenny w coraz większej liczbie chorób neurologicznych.

Podczas gdy myasthenia gravis reprezentuje prototypową chorobę neurologiczną, w której pośredniczą przeciwciała (Ab), w ciągu ostatnich dwóch dekad zidentyfikowano o wiele więcej zaburzeń charakteryzujących się tym, że przeciwciała są ukierunkowane na antygeny neuronalne lub glejowe. Ubytek humoralnych składników immunologicznych, w tym immunoglobuliny G (IgG), poprzez wymianę osocza lub immunoadsorpcję, jest skuteczną strategią terapeutyczną w większości tych stanów chorobowych.

Noworodkowy receptor Fc (FcRn), wyrażany głównie przez komórki śródbłonka i szpiku, ułatwia recykling IgG i wydłuża okres półtrwania cząsteczek IgG. Blokada FcRn zapobiega wiązaniu endogennej IgG do FcRn, co zmusza te przeciwciała do degradacji lizosomalnej, prowadząc do wyczerpania IgG. Zwiększenie degradacji endogennej IgG przez terapie ukierunkowane na FcRn okazało się potężnym podejściem terapeutycznym u pacjentów z uogólnionym MG i jest obecnie testowane w badaniach klinicznych pod kątem kilku innych chorób neurologicznych, w tym autoimmunologicznych encefalopatii, zaburzeń ze spektrum zapalenia nerwu wzrokowego i neuropatii zapalnych. Niniejszy przegląd ilustruje mechanizmy terapii ukierunkowanych na FcRn i ocenia ich potencjał w leczeniu chorób neurologicznych.

Receptor Fc (FcR) jest ważnym receptorem opsoninowym na powierzchni komórek odpornościowych, odgrywającym ważną rolę w zależnej od przeciwciał odporności komórkowej.

Nasza poprzednia praca wykazała, że ​​FcR flądry wykazywał wyraźną odpowiedź ekspresyjną w fagocytujących komórkach IgM ⁺  B, co sugerowało, że FcR może uczestniczyć w regulacji fagocytozy opsonizowanej przez Ig. W niniejszej pracy, w celu wyjaśnienia potencjalnej roli FcR w pośredniczeniu w fagocytozie  limfocytów IgM ^{+ B, przygotowano surowicę przeciw} E. tarda flądry  i inaktywowano dopełniacz do użycia w  opsonizacji E. tarda  oraz surowicę zdrowej flądry były używane jako kontrola.

Analiza cytometrii przepływowej wykazała, że ​​wskaźniki fagocytozy  E. tarda  opsonizowanych antysurowicą w limfocytach mIgM ⁺  B krwi obwodowej były znacznie wyższe niż w grupie kontrolnej, a wyższe wskaźniki fagocytozy limfocytów mIgM ⁺  B można było wykryć wraz ze wzrostem czasu inkubacji w zakresie od 1 do 5 godz. Wskaźniki fagocytozy  E. tarda  opsonizowanej antysurowicą przez limfocyty mIgM ⁺  B dla czasu inkubacji 1, 3 lub 5 godzin wynosiły odpowiednio 51,1, 63,0 i 77,5%, i były znacznie wyższe niż wskaźniki fagocytozy w grupach kontrolnych z 40,2 , odpowiednio 50,9 i 63,8%. Podczas gdy fragment Fc IgM na powierzchni opsonizowanej  E. tarda została zablokowana przez królicze przeciwciała poliklonalne IgM przeciwko flączce, wskaźniki fagocytozy limfocytów mIgM ⁺  B znacznie spadły w porównaniu z grupą niezablokowaną. Co więcej, odsetek limfocytów mIgM ⁺  B z wyższymi poziomami wewnątrzkomórkowych reaktywnych form tlenu (ROS) wzrósł do 32,1% z poziomu kontrolnego 23,0% po fagocytozie opsonizowanego antysurowicą  E. tarda .

Fc Receptor Blocker, 15ml
NB309-15	Innovex	15 ml	470.4 EUR
Color Reagent A, 15ML
X094-15ML	Arbor Assays	15ML	146.4 EUR
Color Reagent B, 15ML
X095-15ML	Arbor Assays	15ML	146.4 EUR
Fc Receptor Blocker; 4X Concentrate, 15ml NEW
NB309-4X-15	Innovex	15 ml of 4X	930 EUR
15ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, UNASSEMBLED
SCT-15ML-500	CORNING	50/pk	111.6 EUR
Amersham ECL blocking agent 40g
RPN2125	Scientific Laboratory Supplies	EACH	70.68 EUR
Goat Anti-Human IgM (Fc 5u) Antibody (HRP)
abx023528-15ml	Abbexa	1.5 ml	610.8 EUR
Sheep IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative
7615-Fc	Alpha Diagnostics	1 kit	854.4 EUR
Horse IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative
7715-Fc	Alpha Diagnostics	1 kit	854.4 EUR
15ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, ASSEMBLED, PRE-STERILIZED
SCT-15ML-25-S	CORNING	25/pk	133.2 EUR
Dog IgG (Fc) fragment (isotype control, non-immune), purified
20016-FC	Alpha Diagnostics	0.5 mg	300 EUR
15ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, RACKED, ASSEMBLED, PRE-STERILIZED
SCT-15ML-R-S	CORNING	50/pk	146.4 EUR
Human IgG (Fc) fragment, purified
20007-1-FC	Alpha Diagnostics	0.5 mg	249.6 EUR
Mouse IgG (Fc) fragment, purified
20008-1-FC	Alpha Diagnostics	0.5 mg	300 EUR
Rabbit IgG (Fc) fragment, purified
20009-1-FC	Alpha Diagnostics	0.5 mg	300 EUR
Goat IgG (Fc) fragment, purified
20011-1-FC	Alpha Diagnostics	0.5 mg	300 EUR
Rat IgG (Fc) fragment, purified (isotype control)
20005-1-FC	Alpha Diagnostics	0.5 mg	300 EUR
Goat IgG (fc)-Biotin conjugate (isotype control)
20011-Fc-B	Alpha Diagnostics	100 ug	196.8 EUR
Goat IgG (fc)-FITC conjugate (isotype control)
20011-Fc-F	Alpha Diagnostics	100 ug	196.8 EUR
Goat IgG (fc)-HRP conjugate (isotype control)
20011-Fc-HP	Alpha Diagnostics	100 ug	196.8 EUR
Antitumor agent-3
HY-15961	MedChemExpress	5mg	639.6 EUR
Antifungal agent 1
HY-102025	MedChemExpress	50mg	2664 EUR
Antiulcer Agent 1
HY-U00122	MedChemExpress	1mg	391.2 EUR
Anticonvulsant agent 1
HY-U00348	MedChemExpress	5mg	3415.2 EUR
Bronchospasmolytic agent 1
HY-U00405	MedChemExpress	1mg	555.6 EUR
Antitumor agent-4
HY-U00414	MedChemExpress	20mg	16126.8 EUR
Bifunctional Antiplatelet Agent
H-1662.0001	Bachem	1.0mg	356.4 EUR
Bifunctional Antiplatelet Agent
H-1662.0005	Bachem	5.0mg	1311.6 EUR
PDE Binding Agent
60390	BPS Bioscience	100 µl	150 EUR
Dog IgG (Fc) fragment (isotype control, non-immune), purified
20016-3-FC	Alpha Diagnostics	0.5 mg	300 EUR
Dog IgG Fc-Biotin Conjugate (isotype control, non-immune), purified
20016-FC-B	Alpha Diagnostics	0.1 mg	270 EUR
Dog IgG Fc-FITC Conjugate (isotype control, non-immune), purified
20016-FC-F	Alpha Diagnostics	0.1 mg	270 EUR
Dog IgG Fc-HRP Conjugate (isotype control, non-immune), purified
20016-FC-HP	Alpha Diagnostics	0.1 mg	270 EUR
15PL 15mL Rack for 15mL Tubes
HS23215	Scientific Laboratory Supplies	EACH	35.45 EUR
EL Transfection Reagent
20-abx098880	Abbexa	460.80 EUR 644.40 EUR	0.75 ml 1.5 ml
Sufa synergist agent(SSA)
AG243	Unibiotest	1 mg	627.6 EUR
Sufa synergist agent(SSA)
AT243	Unibiotest	1mg	1641.6 EUR
Anti-inflammatory agent 1
HY-U00273	MedChemExpress	10mg	1746 EUR
Anti-inflammatory agent 2
HY-U00299	MedChemExpress	20mg	5763.6 EUR
Anti-neurodegeneration agent 1
HY-U00314	MedChemExpress	20mg	5763.6 EUR
Decitabine (DNA hypomethylation agent)
SIH-352-10MG	Stressmarq	10 mg	192 EUR
Decitabine (DNA hypomethylation agent)
SIH-352-50MG	Stressmarq	50 mg	406.8 EUR
Vildagliptin (Anti-diabetic agent)
SIH-567-100MG	Stressmarq	100 mg	277.2 EUR
Vildagliptin (Anti-diabetic agent)
SIH-567-20MG	Stressmarq	20 mg	138 EUR
Label 100X100 Oxidizing Agent..
C47AS	Scientific Laboratory Supplies	EACH	4.89 EUR
Label 200X200 Oxidizing Agent..
C47BS	Scientific Laboratory Supplies	EACH	12.45 EUR
Recombinant (HEK) Human IgG3-Fc (99-377aa, His-tag, >95%, low endotoxin)
20007-G3-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Rat IgG (Fc)-Biotin Conjuagte (isotype control), purified
20005-1-FC-B	Alpha Diagnostics	0.1 mg	270 EUR
Rat IgG (Fc)-FITC Conjuagte (isotype control), purified
20005-1-FC-F	Alpha Diagnostics	0.1 mg	270 EUR
Rat IgG (Fc)-HRP Conjuagte (isotype control), purified
20005-1-FC-HP	Alpha Diagnostics	0.1 mg	270 EUR
Human IgG (Fc) fragment, purified (>95%, low endotoxin)
20007-1-FC-LE	Alpha Diagnostics	100 ul	270 EUR
Recombinant (HEK) Mouse IgG2a-Fc (98-330aa, ~34 kda, His-tag, >95%, low endotoxin)
20102-102-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Recombinant (HEK) Mouse IgG2b-Fc (97-335aa, ~37 kda, His-tag, >95%, low endotoxin)
20102-103-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Recombinant (HEK) Mouse IgG3-Fc (97-329aa, ~33 kda, His-tag, >95%, low endotoxin)
20102-104-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Recombinant (HEK) Human IgG1 Fc (103Cys/Ser, 99-330aa, His-tag, >95%, low endotoxin)
20007-G1-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Recombinant (HEK) Human IgG2-Fc (257Ser/Ala, 99-327aa, His-tag, >95%, low endotoxin)
20007-G2-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Recombinant (HEK) Human IgG4-Fc (108Ser/Pro, 99-327aa, His-tag, >95%, low endotoxin)
20007-G4-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Recombinant Human CD47 Protein, His-Fc (IgG), Insect-10ug
QP11336-HIS-Fc-10ug	EnQuireBio	10ug	241.2 EUR
Recombinant (HEK) Mouse IgG1-Fc (98-321aa, 102Cys/Ser, ~32 kda, His-tag, >95%, low endotoxin)
20102-101-FC	Alpha Diagnostics	50	343.2 EUR
Human IgG Fc-Biotin conjugate (isotype control, non-immune), purified
20007-1-Fc-B	Alpha Diagnostics	0.1 mg	196.8 EUR
Human IgG Fc-FITC conjugate (isotype control, non-immune), purified
20007-1-Fc-F	Alpha Diagnostics	0.1 mg	196.8 EUR
Human IgG Fc-HRP conjugate (isotype control, non-immune), purified
20007-1-Fc-HP	Alpha Diagnostics	0.1 mg	196.8 EUR
AEC Enhancer, 15ml
NB319	Innovex	15 ml	266.4 EUR
Colorex MRSA (15ml)
MED1282	Scientific Laboratory Supplies	PK10	12.44 EUR
Tube support 15mL
MIX1348	Scientific Laboratory Supplies	EACH	96.9 EUR
Conical Tubes 15mL
E0030122208	Scientific Laboratory Supplies	PK200	70.68 EUR
Conical Tubes 15mL
E0030122259	Scientific Laboratory Supplies	PK100	80.94 EUR
Phase Separator 15ml
CHR5382	Scientific Laboratory Supplies	PK100	118.56 EUR
Volumetric Pipette 15mL
PIP1228	Scientific Laboratory Supplies	PK12	343.14 EUR
Anti-Heart Failure Agent 1
HY-101729	MedChemExpress	20mg	12754.8 EUR
5-Azacytidine (DNA hypomethylation agent)
SIH-345-250MG	Stressmarq	250 mg	208.8 EUR
5-Azacytidine (DNA hypomethylation agent)
SIH-345-50MG	Stressmarq	50 mg	126 EUR
Reducing Agent (for Silica Testing)
RAST01	Scientific Laboratory Supplies	100ML	102.6 EUR
CO2 Std CO2 Release Agent
RR0207	Scientific Laboratory Supplies	1L	131.1 EUR
PDE Binding agent diluent (cAMP)
60391	BPS Bioscience	10 ml	110 EUR
PDE Binding agent diluent (cGMP)
60392	BPS Bioscience	10 ml	100 EUR
Fc Receptor Blocker, 60ml
NB309	Innovex	60 ml	999.6 EUR
Fc Receptor Blocker, 30ml
NB309-30	Innovex	30 ml	609.6 EUR
Fc Receptor Blocker, 5ml
NB309-5S	Innovex	5 ml	225.6 EUR
PCR SuperMix (-dye)
20-abx098002	Abbexa	493.20 EUR 226.80 EUR 309.60 EUR	15 ml 1 ml 5 ml
PCR SuperMix for PAGE (+dye)
20-abx098004	Abbexa	493.20 EUR 226.80 EUR 309.60 EUR	15 ml 1 ml 5 ml
Green qPCR SuperMix
20-abx098031	Abbexa	1245.60 EUR 526.80 EUR 760.80 EUR	15 ml 1 ml 5 ml
Green qPCR SuperMix UDG
20-abx098032	Abbexa	1362.00 EUR 543.60 EUR 794.40 EUR	15 ml 1 ml 5 ml
Probe qPCR SuperMix
20-abx098040	Abbexa	1245.60 EUR 526.80 EUR 760.80 EUR	15 ml 1 ml 5 ml
CoolRack 15ml holds 9 x 15ml conical centrifuge tube
432061	Scientific Laboratory Supplies	EACH	343.14 EUR
Human IgG (Fc) fragment-Biotin purified (>95%, low endotoxin)
20007-1-FC-LE-B	Alpha Diagnostics	25 ug	343.2 EUR
Bialaphos sodium - bar gene selective agent
B013-100MG	TOKU-E	100 mg	186 EUR
Bialaphos sodium - bar gene selective agent
B013-500MG	TOKU-E	500 mg	688.8 EUR
Attoglow Western Blot Analysis Kit:Blocking Agent
K3171250-3	Biochain	40 g	130.8 EUR
CO2 Std CO2 Release Agent 200mL
RR021	Scientific Laboratory Supplies	PK6	169.86 EUR
Recombinant (HEK) Rabbit IgG (Fc) (101-323aa, 185Thr/Asn284Ser, ~33 kda, >95%, Low Endotoxin)
20009-1-R-FC	Alpha Diagnostics	50 ug	343.2 EUR
Conical Tubes 15ml Racked
339651	Scientific Laboratory Supplies	PK500	348.84 EUR
Bottle Hdpe Amber 15Ml
2004-9050	Scientific Laboratory Supplies	PK12	18.24 EUR
Bottle Alpha 15ml Amber
BOT2036	Scientific Laboratory Supplies	PK110	67.03 EUR
Block 12 x 15mL
MIX7214	Scientific Laboratory Supplies	EACH	524.4 EUR
Crucible Silica 15ml 41x25mm
CRU3004	Scientific Laboratory Supplies	EACH	43.32 EUR
Nalgene 15ml Cryo Container
CRY8320	Scientific Laboratory Supplies	PK75	172.14 EUR
Eppendorf 15mL Tubes Sterile
E0030122151	Scientific Laboratory Supplies	PK500	163.02 EUR
15mL Conical Tubes Amber
E0030122194	Scientific Laboratory Supplies	PK200	66.12 EUR
Tube Holder 5/15mL
E5353040148	Scientific Laboratory Supplies	EACH	100.32 EUR

Stwierdzono, że FcγRII i Syk były znacząco podwyższone, podczas gdy FcγRIII był znacząco obniżone w limfocytach mIgM ⁺  B po fagocytozie. Ponadto, gdy FcγRII limfocytów mIgM ⁺  B był blokowany przez wytworzone przeciwciała, ich współczynnik fagocytozy  E. tarda opsonizowanych surowicą  wynosił 39,0%, co było znacznie niższe niż w grupie odblokowanej 54,0%. Wyniki te pokazują, że FcR odgrywa kluczową rolę w pośredniczeniu w fagocytozie i aktywności bakteriobójczej limfocytów mIgM ⁺  B, co ułatwiłoby lepsze zrozumienie ról regulatorowych FcR w fagocytozy limfocytów teleost B.